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細胞培養中的鐵和亞鐵

更新時間:2019-05-27  |  點擊率:1949

鐵,在細胞培養中非常重要。即使在生物制藥、組織工程等領域所用的無血清培養基中,鐵也是一種重要的補充劑。

 

但它是一把雙刃劍,同時具有有益和有毒的特性。因此,對鐵的調控非常重要。在生理狀態下,在使用血清時,血清中有轉鐵蛋白,它可介導鐵從培養基中輸運到細胞內。而使用無血清、不含動物蛋白的培養基,則極大地增加了培養中鐵毒性的可能性。這在生物制藥和組織工程中尤為關鍵,其中鐵介導的氧化和羰基應激可以改變細胞培養產物的化學性質。

 

一些人工合成培養基中含有硝酸鐵或硫酸亞鐵,有些培養基則采取了螯合鐵。而采用新生牛血清或胎牛血清,血清中的結合蛋白質能與有毒金屬結合,起到解毒作用,例如轉鐵蛋白能結合鐵離子,進行細胞外基質中鐵離子濃度的調控。

 

鐵對細胞呼吸和代謝至關重要。沒有鐵,細胞就會停止生長并終死亡。鐵可以進行單價的氧化還原反應。其氧化和還原形式分別稱為鐵和亞鐵。鐵在細胞培養系統中的主要功能如下:

 

血紅蛋白是哺乳動物中富含血紅素的蛋白,其主要功能是結合、運輸和釋放分子氧。在氧結合,運輸和釋放期間,血紅蛋白結合的鐵保持在亞鐵狀態。當血紅蛋白結合鐵被氧化成三價鐵時,它不能輸送氧氣。氧化血紅蛋白被稱為高鐵血紅蛋白。

 

細胞色素是一組含有血紅素的蛋白質,位于線粒體中。它們的功能是沿著呼吸鏈順序轉移電子,導致氧氣還原成水,并以ATP的形式儲存能量。通過細胞色素轉移電子涉及鐵的氧化和還原循環。

 

鐵以非血紅素形式存在,作為琥珀酸脫氫酶的一部分,琥珀酸脫氫酶是一種催化富馬酸鹽形成的酶。

 

作為一種酶輔助因子,鐵可以保護細胞免受氧化損傷。它作為過氧化氫酶和過氧化物酶等酶的血紅素成分存在,催化過氧化物向水的轉化。

 

在生理溶液中同時存在亞鐵和三價鐵,它經常作為硝酸鹽或硫酸鹽添加到細胞培養基中,并經歷氧化反應。鐵對培養基中氧還電位的敏感性取決于絡合分子。鐵的絡合分子包括氨基酸,核苷酸,生理螯合劑和蛋白質。

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Ausbian精制新生牛血清(γ照射)產自澳洲,血源來自新西蘭,經過0.22微米過濾和15kGy的gamma射線照射,避免了存在微生物的風險。新生牛血清中富含可能組織細胞所需的發育因子、血漿蛋白等,保證營養和解毒功能。

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