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優質的新生牛血清可以很好的培養干細胞

更新時間:2021-04-07  |  點擊率:1005

新生牛血清被廣泛應用于疫苗產品等大量生產生物制品領域,而培養干細胞大部分實驗室仍采用品質更高的胎牛血清,其實在培養腸道干細胞已經有實驗室采用新生牛血清嘗試培養,下面我們來看看相關實驗結果。

 

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腸道干細胞位于腸隱窩內,在維持腸道屏障結構和功能完整方面扮演著重要角色。用體外培養技術對腸干細胞進行原代培養,以進一步了解其增殖分化機制,這對治療腸道相關疾病具有重要意義。而血清品質和濃度對原代細胞貼壁和生長則具有相當大的影響。有人曾嘗試采用DMEM加新生牛血清或胎牛血清進行腸道干細胞的原代培養。嘗試的血清濃度分別為 5%、10%、15%及 20%,并且還加入表皮生長因子20ng/ml、胰島素2 g/ml、谷氨酰胺 2 mmol/ml、青霉素及鏈霉素各 100 U/ml。腸干細胞的鑒定則采用用角蛋白18抗體(腸干細胞為陽性)以及波形蛋白抗體(腸干細胞為陰性,間質細胞為陽性)進行組化染色和鑒定。

作者對胚胎鼠腸組織進行的腸干細胞的分離和培養。結果顯示,只有采用10%新生牛血清加DMEM的培養方式效果很好,在培養24~48h后,貼壁生長的細胞絕大部分為上皮細胞,上皮樣細胞呈集落狀生長,這與國外報道的細胞形

態基本符合,其雜質細胞卻很少見到。而其他血清加DMEM的培養則鏡下顯示,細胞含有大量呈梭狀的間質細胞,上皮細胞所占比例不足 5%。由上可見,采

用含10%新生牛血清的細胞培養基進行腸干細胞群的構建可以獲得較為純化的腸干細胞群,角蛋白18染色陽性,波形蛋白染色陰性。因此,選擇合適的血清質量和濃度對干細胞的培養有著十分重要的意義。

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